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簡要描述:FITC-Taurine,F(xiàn)ITC-?;撬崾且环N將熒光染料FITC與?;撬嵬ㄟ^共價鍵結合形成的熒光標記化合物,廣泛應用于生物醫(yī)學研究領域。
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更新時間:2025-06-11
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簡要描述:FITC-Taurine,F(xiàn)ITC-?;撬崾且环N將熒光染料FITC與?;撬嵬ㄟ^共價鍵結合形成的熒光標記化合物,廣泛應用于生物醫(yī)學研究領域。




FITC-Taurine,F(xiàn)ITC-?;撬?/strong>是一種將熒光染料FITC與?;撬嵬ㄟ^共價鍵結合形成的熒光標記化合物,廣泛應用于生物醫(yī)學研究領域。以下從其結構特性、合成方法、應用場景及使用注意事項等方面進行詳細介紹:
一、結構與特性
FITC(異硫氰酸熒光素)
是一種常用的綠色熒光染料,激發(fā)波長約為495 nm,發(fā)射波長約為519 nm,發(fā)出明亮的黃綠色熒光。
其化學結構中的異硫氰酸酯基團(-NCS)可與含有氨基(-NH?)或巰基(-SH)的分子發(fā)生共價結合,形成穩(wěn)定的熒光標記物。
牛磺酸(Taurine)
化學名稱為2-氨基乙磺酸,是一種含硫的非蛋白氨基酸,廣泛存在于動物組織中,尤其在神經(jīng)、肌肉和視網(wǎng)膜中含量較高。
?;撬嵩谏矬w內(nèi)具有多種生理功能,如調(diào)節(jié)滲透壓、抗氧化、參與神經(jīng)傳導和膽汁酸代謝等。
FITC-Taurine的結構
通過FITC的異硫氰酸酯基團與?;撬岬陌被磻纬煞€(wěn)定的硫脲鍵(-NH-C(=S)-NH-),從而將熒光基團引入?;撬岱肿又小?/p>
標記后的FITC-Taurine既保留了?;撬岬纳锘钚裕仲x予其熒光特性,便于在生物體系中追蹤和檢測。
二、合成方法
FITC-Taurine的合成通常通過以下步驟實現(xiàn):
試劑準備
FITC(異硫氰酸熒光素)
?;撬幔═aurine)
緩沖液(如碳酸鹽緩沖液,pH 9.0-9.5)
有機溶劑(如二甲基亞砜,DMSO,用于溶解FITC)
反應條件
將FITC溶解于少量DMSO中,加入到?;撬岬木彌_液中。
在避光條件下,室溫或低溫(4°C)攪拌反應數(shù)小時至過夜。
反應結束后,通過透析或凝膠過濾色譜去除未反應的FITC和小分子雜質。
凍干或冷凍保存最終產(chǎn)物。
注意事項
反應需在弱堿性條件下進行,以促進異硫氰酸酯基團與氨基的反應。
FITC對光敏感,整個合成過程需避光操作。
反應產(chǎn)物需通過高效液相色譜(HPLC)或質譜(MS)進行純度和結構驗證。
三、應用場景
細胞生物學研究
細胞攝取與分布:利用FITC-Taurine的熒光特性,研究?;撬嵩诩毎麅?nèi)的攝取途徑、亞細胞定位及動態(tài)變化。
代謝研究:通過熒光成像技術,追蹤?;撬嵩诩毎麅?nèi)的代謝過程,揭示其與能量代謝、抗氧化防御等生理過程的關聯(lián)。
神經(jīng)生物學研究
神經(jīng)遞質功能:?;撬嵩谏窠?jīng)系統(tǒng)中作為神經(jīng)遞質或調(diào)質發(fā)揮作用,F(xiàn)ITC-Taurine可用于研究其在神經(jīng)元之間的傳遞機制。
神經(jīng)保護作用:通過熒光標記,觀察牛磺酸在神經(jīng)損傷或退行性疾病模型中的保護作用及其機制。
藥理學與毒理學研究
藥物作用機制:研究藥物對?;撬岽x或功能的影響,評估藥物的安全性和有效性。
毒性評估:通過FITC-Taurine標記,觀察外源性物質對細胞內(nèi)?;撬崴降挠绊?,評估其潛在毒性。
四、使用注意事項
儲存條件
FITC-Taurine應避光保存于-20°C,避免反復凍融,以防止熒光淬滅和降解。
實驗操作
所有操作需在避光條件下進行,使用熒光顯微鏡或流式細胞儀檢測時,需選擇合適的激發(fā)和發(fā)射波長。
標記效率可能受反應條件(如pH、溫度、時間)影響,需優(yōu)化實驗參數(shù)以獲得優(yōu)良結果。
生物安全性
FITC-Taurine主要用于體外研究,如需用于體內(nèi)實驗,需評估其生物相容性和潛在毒性。
實驗過程中需遵守實驗室安全規(guī)范,避免直接接觸或吸入FITC-Taurine粉末。
FITC-Taurine,F(xiàn)ITC-牛磺酸
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